用血清药理学方法观察冬连三七组分调控TGF-β1/p38MAPK/CREB通路改善糖尿病动脉硬化兔平滑肌细胞增殖的机理研究

作者：靳昭辉; 靳冰^*; 高普; 宋光熠; 刘征堂; 相田园

来源：云南中医药大学学报, 2018, 41(03): 6-11.

DOI：10.19288/j.cnki.issn.1000-2723.2018.03.002

• 冬连三七组分
• 血管平滑肌细胞增殖
• p38MAPK
• 糖尿病动脉粥样硬化

目的采用血清药理学方法观察冬连三七组分(CONR)干预TGF-β1/p38MAPK/CREB通路对糖尿病动脉硬化兔血管平滑肌细胞增殖的影响。方法 1.选择纯种雄性新西兰家兔5只,4只分别每日给予辛伐他汀3 mg/kg,CONR150 mg/kg、450 mg/kg灌胃,共10 d;SB203580腹腔注射2 mg/kg,Q12 h,10 d;另一只每日给予生理盐水20 mL作为对照。制备含药血清。2.正常雄性新西兰大白兔静脉推注四氧嘧啶并且配合高脂饮食、腹主动脉内膜球囊损伤术诱导糖尿病动脉粥样硬化模型。3.造模成功后,分离模型兔腹主动脉SMC,并传代培养,使用3代细胞进行实验。4.分组:设立正常组、模型组、CONR高剂量组、CONR低剂量组、SB203580组、辛伐他汀组,实验组予含药血清进行干预,空白组、模型组予正常血清进行干预。5.采用cck-8法测定相应的吸光度,计算50%抑制率浓度;WB法检测各组平滑肌p-CREB、p-p38MAPK、TGF-β1蛋白的表达。结果离体实验表明CONR对平滑肌细胞增殖具有抑制作用,其50%抑制率浓度(IC50)为12.53μg/mL。CONR高、低剂量组、SB203580组及辛伐他汀组对p-CREB、p-p38MAPK、TGF-β1蛋白表达均有抑制作用,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01);辛伐他汀组及CONR 2组优于SB203580组对p-p38MAPK蛋白的抑制(P<0.01),3组之间差异无统计学意义(P<0.01)。实验4组对TGF-β1、p-CREB蛋白有抑制作用,4组间无显著统计学差异(P>0.05)。结论冬连三七组分可能部分通过抑制TGF-β1/p38MAPK/CREB通路抑制DA兔VSMC的增殖。

• 单位
  辽宁省基础医学研究所; 中国中医科学院西苑医院