大鼠胰岛分离纯化新方法“两步过筛法”的建立及评估

作者：陆忠; 沈水仙; 支涤静; 罗飞宏

来源：中国当代儿科杂志, 2013, (07): 572-576.

• 胰岛
• 分离
• 纯化
• 滤网
• 大鼠 Islets
• Isolation
• Purification
• Filter
• Rats

目的建立胆管内灌注胶原酶分离胰岛与适宜孔径滤网过筛相结合的快速纯化胰岛细胞的方法并评估这种方法的效果。方法清洁级8～12周龄Sprague-Dawley大鼠胆总管内灌注胶原酶消化、分离胰岛,分别采用Ficoll不连续密度梯度离心法和两次经不同孔径滤网过滤的两步过筛法纯化胰岛细胞,行双硫腙(dithizone,DTZ)染色、吖啶橙/碘丙啶(acridine orange/propidium iodide,AO/PI)双色荧光染色法分析分离胰岛的纯度与活率;行葡萄糖刺激—胰岛素释放试验检测细胞活性;采用免疫组化荧光染色法观察胰岛细胞胰岛素的合成功能。结果大鼠两步过筛法和胰岛密度梯度离心法胰岛细胞收...

• 单位
  复旦大学附属儿科医院