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摘要
比较白头翁汤正丁醇提取物主要组分秦皮甲素、盐酸小檗碱、白头翁皂苷B4对中性粒细胞趋化抑制作用的影响。将HL60细胞培养于配制好的1640完全培养基中培养,按2×105个/mL细胞密度置于6孔板中,每孔4 mL,按体积分数1.3%加入DMSO培养5 d,于倒置显微镜检查细胞形态变化;流式细胞术分析DMSO诱导后细胞CD11b的表达;采用CCK8法检测秦皮甲素、盐酸小檗碱、白头翁皂苷B4对DMSO诱导后细胞增殖的影响;采用Transwell法检测秦皮甲素、盐酸小檗碱、白头翁皂苷B4对DMSO诱导后细胞迁移的影响;采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测秦皮甲素,盐酸小檗碱,白头翁皂苷B4对DMSO诱导后细胞F-actin的产生及其极化的调节;Western blot检测PI3K/Akt的表达。结果表明,HL60细胞经DMSO诱导后,细胞呈典型的中性粒细胞形态。流式细胞术分析表明诱导后细胞CD11b的表达水平明显增加。100μg·mL-1秦皮甲素,8μg·mL-1盐酸小檗碱,80μg·mL-1白头翁皂苷B4可有效地抑制中性粒细胞的迁移,明显降低F-actin的表达;其中盐酸小檗碱可显著地降低磷酸化PI3K/Akt蛋白水平。上述结果表明,BAEB 3种主要组分对中性粒细胞趋化均有抑制作用,其中盐酸小檗碱的作用最明显,该作用可能与抑制F-actin及PI3K/Akt通路相关。
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