Bmi-1 shRNA慢病毒表达载体的构建及稳转U266细胞株的建立

作者：徐珍珍; 吴顺泉; 战榕

来源：中国实验血液学杂志, 2012, (02): 473-477.

• Bmi-1基因
• RNA干扰
• U266细胞 Bmi-1 gene
• RNA interference
• U266 cell

本研究构建Bmi-1基因的shRNA慢病毒表达载体,建立U266-li稳定细胞株,为下一步Bmi-1的功能研究及应用RNAi技术治疗打下基础。设计、合成1对针对Bmi-1 mRNA的shRNA序列,退火后连接到pLVTHM干扰载体上,与psPAX2、PMD2G共转染HEK 293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染U266细胞,建立稳定细胞株;应用实时PCR和Western blot技术分别检测U266稳定细胞中Bmi-1及P14 mRNA和蛋白水平的表达,并与对照组进行比较。结果表明,成功构建了针对Bmi-1基因的shRNA慢病毒表达载体,病毒滴度为5×107 TU/ml;建立稳定...

• 单位
  福建医科大学附属协和医院