β-胡萝卜素加强的转基因水稻培育

作者：杜丽缺; 赵明超; 林拥军; 陈浩

来源：华中农业大学学报, 2014, 33(05): 1-7.

DOI：10.13300/j.cnki.hnlkxb.2014.05.025

• 水稻
• 维生素A
• 八氢番茄红素合酶
• 八氢番茄红素脱氢酶
• 黄金米

为了使水稻种子积累维生素A的前体——β-胡萝卜素,将人工合成的来源于欧文氏菌的八氢番茄红素脱氢酶基因(crtI)和来源于玉米的八氢番茄红素合酶基因(psy)导入水稻中,且在水稻胚乳中特异性表达。结合PCR和Southern blotting的检测结果,从psy/crtI转化植株中分离得到1个外源基因单拷贝插入且无选择标记(Marker-free)的纯合转基因家系ky1-4。通过热不对称交错PCR(Tail-PCR)分离得到ky1-4的T-DNA插入位点右边界的侧翼序列,结合Southern blotting检测结果推测该插入位点位于水稻第11号染色体上。超高效液相色谱(UPLC)分析结果表明,psy/crtI转化水稻植株种子中β-胡萝卜素含量为(1.99±0.11)4.41±0.30μg/g,其中ky1-4家系β-胡萝卜素的含量为(3.11±0.08)μg/g。

• 单位
  作物遗传改良国家重点实验室; 华中农业大学