虫草素对脂多糖诱导大鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用

作者：杨永丽; 项辉; 肖志英^*

来源：中华危重病急救医学, 2021, 33(02).

• 虫草素
• 脂多糖
• 肾小管上皮细胞
• 核转录因子-κB

目的探讨虫草素对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用及机制。方法取大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E, 以1×105/mL接种于细胞培养板, 并将传至第3代的细胞分为正常对照组(Ctrl组)、LPS组(1 mg/L的LPS刺激细胞)、10 μmol/L和20 μmol/L虫草素干预组(LPS+C 10组、LPS+C 20组)。采用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞活性;2’’, 7’’-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色法检测细胞内活性氧(ROS)水平;用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测炎症相关因子细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)以及核转录因子-κB(NF-κB)的蛋白表达。结果与Ctrl组比较, LPS可明显抑制NRK-52E细胞活性, 增加细胞内ROS含量, 上调ICAM-1、VCAM-1、IL-1β以及NF-κB的蛋白表达。与LPS组比较, 经10 μmol/L或20 μmol/L虫草素处理后, NRK-52E细胞活性明显升高(以Ctrl组为1:0.717±0.017、0.916±0.036比0.554±0.046), 细胞内ROS水平明显降低(以Ctrl组为1:1.527±0.165、1.098±0.168比2.543±0.127), 同时ICAM-1、VCAM-1、IL-1β及NF-κB的蛋白表达均明显下调〔以Ctrl组为1:ICAM-1/GAPDH为2.364±0.097、1.561±0.074比3.101±0.121, VCAM-1/GAPDH为2.866±0.135、1.920±0.098比4.170±0.119, IL-1β/GAPDH为2.358±0.107、1.563±0.179比3.301±0.210, 磷酸化NF-κB p65(NF-κB p-p65)/GAPDH为2.559±0.166、1.596±0.148比3.183±0.098〕, 差异均有统计学意义(均P<0.05);且与LPS+C 10组比较, LPS+C 20组细胞活性更为显著(0.916±0.036比0.717±0.017, P<0.01), ICAM-1、VCAM-1、IL-1β及NF-κB蛋白表达下调更加明显(ICAM-1/GAPDH:1.561±0.074比2.364±0.097, VCAM-1/GAPDH:1.920±0.098比2.866±0.135, IL-1β/GAPDH:1.563±0.179比2.358±0.107, NF-κB p-p65/GAPDH:1.596±0.148比2.559±0.166, 均P<0.05)。结论虫草素可显著增加LPS诱导肾小管上皮细胞损伤的细胞活性, 降低细胞内ROS水平, 抑制细胞炎症, 其抑制炎症作用可能与NF-κB通路相关。

• 单位
  江汉大学; 武汉大学中南医院