RNA干扰逆转肝细胞癌多药耐药

作者：潘光栋; 严律南; 王新平; 杨家印; 夏庆杰; 闫乃红; 陈清英; 张发强

来源：第三军医大学学报, 2008, (01): 35-38.

DOI：10.3321/j.issn:1000-5404.2008.01.010

• 肝细胞癌
• 多药耐药
• RNA干扰

目的筛选高效dsRNA/mdr1,以备研究RNA干扰逆转肝细胞癌多药耐药之用。方法首先根据siRNA设计原则,以多药耐药基因（mdr1）为靶基因,设计并选择45条siRNA/mdr1,经BLAST后体外转录法合成dsRNA/mdr1,用Oligofectamine试剂分别转染HepG2/mdr1,然后从mRNA、蛋白（P-gp）表达水平和细胞功能变化评价HepG2/mdr1耐药性被逆转的程度,比较各个dsRNA/mdr1的逆转效率,筛选出有效的siRNA/mdr1。结果成功合成5条dsRNA/mdr1（其中1条为阴性对照）,dsRNA/mdr1-4mRNA表达（18.73±1.33）%、蛋白表达变化（79.1±1.6）%16.8±0.4%与其他各组细胞比较,有显著性差异;细胞内柔红霉素（DNR）累积量也较其他组明显增加（平均荧光强度79.58,阳性率84.25%,P<0.05）。结论体外转录法结合脂质体转染适用于筛选高效siRNA,肯定了siRNA干扰序列能够有效阻抑mdr1基因编码蛋白p170的功能。

• 单位
  广西医科大学; 四川大学华西医院