摘要
目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂trichostatin A(TSA)对多巴胺能神经细胞的影响。方法将体外培养多巴胺能神经细胞SH-SY5Y分为6组,DMSO处理为对照组,不同浓度(50、100、200、500、1 000 nmol/L)TSA处理为TSA组,处理48 h后行MTT法检测细胞活力;采用200 nmol/L TSA处理细胞不同时间段,MTT法检测细胞活力,Western blot检测Fra1表达;构建腺病毒载体过表达Fra1或对照GFP,检测正常或TSA处理条件下过表达Fra1对细胞活力的影响。结果对照组与50 nmol/L TSA组比较,细胞存活率差异无统计学意义,与100 nmol/L TSA组比较,细胞活力明显减少(P<0.05),随TSA浓度升高,活力减少更显著(P<0.05);200 nmol/L TSA处理细胞8 h未检测到抑制细胞存活(P<0.05),处理16 h有显著抑制作用,处理时间越久抑制效应越明显(P<0.05);Western blot结果显示,TSA处理6 h未抑制Fra1表达(P<0.05),处理12 h明显抑制Fra1表达,24 h抑制效应更显著(P<0.05);过表达Fra1促进细胞存活(P<0.05),显著拮抗TSA的抑制存活效应(P<0.05)。结论 TSA抑制多巴胺能神经细胞存活通过抑制Fra1表达。
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