用液相色谱-串联质谱法测定人血清中25-羟基维生素D的浓度及临床应用

作者：张文杰; 李鹏飞^*

来源：中国临床药理学杂志, 2023, 39(12): 1787-1791.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2023.12.024

• 25-羟基维生素D
• 维生素D
• 液相色谱串联质谱

目的 建立一种血清中25-羟基维生素D2(25-OH VD2)和25-OH VD3的定量分析方法，进行方法的全验证并应用于临床血清分析。方法 血清样本经乙腈沉淀蛋白，以d3-25-OH VD2和d6-25-OH VD3内标。色谱柱：Kinetex C18(3.0 mm×50.0 mm, 2.6μm);流动相：0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸甲醇溶液；梯度洗脱；流速：0.5 mL·min-1;柱温：30℃,进样量：10μL。电喷雾离子化源，正离子模式，多重反应监测。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与准确度、稳定性等。结果 25-OH VD2和25-OH VD3的保留时间分别为2.0和1.9 min,在0.5～50.0 ng·mL-1和1.0～100.0 ng·mL-1内具有良好的线性关系。3个质量浓度的质控样本的加标回收率在94.92%～111.39%内，批内和批间精密度≤7.99%,该方法具备较高的准确度和精密度。室温放置6 h、4～8℃冷藏5 d、-20℃冰冷放置30 d存放条件不影响对分析物浓度进行准确测定。结论 本研究方法前处理简便，分析测试快速，结果准确可靠，可实现血清中25-OH VD2和25-OH VD3的准确测定。

• 单位
  首都医科大学附属北京朝阳医院