建立永生化皮肤成纤维细胞的初步研究:pIRES2-EGFP-hTERT真核表达载体的构建

作者：王新文; 金岩; 邓志宏; 刘源

来源：中国临床康复, 2004, (32): 7140-7141.

• 生物医学工程
• 端粒,末端转移酶
• 质粒

目的:构建同时含有荧光蛋白表达基因和端粒酶催化亚单位(hTERT)表达基因的真核质粒载体,为hTERTcDNA的稳定转染提供快速有效的鉴定手段,并为建立永生化的皮肤成纤维细胞,为皮肤试验提供稳定的细胞系奠定基础。方法:选取带有荧光蛋白表达基因的空载体和带有hTERTcDNA的载体,利用基因重组技术,获得新的载体pIRES2-EGFP-hTERT,筛选阳性克隆进行酶切和序列测定。结果:酶切电泳分析,获得了3.4kb和5.3kb大小的两条片段;测序结果两端序列正确。结论:重组载体pIRES2-EGFP-hTERT构建成功,为hTERTcDNA的稳定转染提供快速有效的鉴定手段,为建立永生化的皮肤成纤维细胞系奠定了基础。

• 单位
  第四军医大学