抑制酪氨酸磷酸酶2活性介导DNA损伤修复影响宫颈癌肿瘤放射敏感性的机制研究

作者：王珍; 迪丽努尔·尼加提; 祁小丽; 朱成斌^*

来源：中国优生与遗传杂志, 2023, 31(09): 1767-1773.

DOI：10.13404/j.cnki.cjbhh.2023.09.024

• 宫颈癌
• 酪氨酸磷酸酶2
• 放射敏感性
• DNA损伤修复

目的 探究抑制酪氨酸磷酸酶2(SHP2)活性介导DNA损伤修复对人宫颈癌细胞放射敏感性的影响及机制。方法 使用不同浓度的SHP2特异性抑制剂PHPS1(5、10、15、20μmol/L)处理人宫颈癌细胞株SiHa,Western blot测定SHP2磷酸化水平变化，MTT法检测细胞增殖抑制率，不同剂量放射线（2、4、6、8 Gy）处理SiHa细胞，MTT法检测细胞增殖抑制率。实验分为对照组、PHPS1组、6 Gy组、PHPS1+6 Gy组，经过20μmol/L PHPS1或（和）6 Gy处理后，MTT法检测4组细胞增殖抑制率，EdU染色检测4组细胞增殖水平，流式细胞术测定4组细胞凋亡率，细胞免疫荧光染色实验观察4组细胞内组蛋白H2AX磷酸化（γ-H2AX）焦点形成情况，Western blot测定4组细胞内DNA损伤修复相关途径分子DNA依赖的蛋白激酶催化亚基（DNA-PKcs）、X线修复交叉互补蛋白4(XRCC4)、重组蛋白A51(RAD51)、乳腺癌易感蛋白1(BRCA1)、p53结合蛋白1(53BP1)蛋白表达。结果 与未经PHPS处理的细胞比较，10、15、20μmol/LPHPS1处理的细胞内p-SHP2蛋白相对表达量下调（P<0.05）,5、10、15、20μmol/LPHPS1处理的细胞增殖抑制率升高（P<0.05）；与未经放射线处理的细胞比较，2、4、6、8Gy放射线处理的细胞增殖抑制率也升高（P<0.05）。与6 Gy组比较，PHPS1+6 Gy组细胞增殖抑制率升高（P<0.05）,EdU阳性率减少（P<0.05），细胞凋亡率增加（P<0.05），细胞内γ-H2AX焦点增加（P<0.05），细胞内DNA-PKcs、XRCC4、RAD51、BRCA1、53BP1蛋白相对表达量下调（P<0.05）。结论 抑制SHP2活性能够增加宫颈癌细胞放射敏感性，从而进一步促进细胞凋亡，该作用可能与其抑制DNA损伤修复过程有关。

• 单位
  新疆维吾尔自治区人民医院