薄荷醇增强白介素-13诱导的人支气管上皮细胞粘液蛋白5AC的合成与分泌

作者：张明洋; 王静; 李敏超^*

来源：南方医科大学学报, 2020, 40(10): 1432-1438.

• 支气管哮喘
• 白细胞介素-13
• 薄荷醇
• 黏液蛋白5AC
• 抗凋亡蛋白
• 瞬时受体电位melastatin 8

目的研究白细胞介素-13(IL-13)联合薄荷醇对人支气管上皮细胞(16HBE)黏液蛋白(MUC)5AC合成及分泌的影响,并探索瞬时受体电位通道(TRP)melastatin 8(TRPM8)和抗凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)在此环节中所起的作用。方法将16HBE细胞分为:对照组、IL-13组(培养基加入终浓度10 ng/m L的IL-13连续刺激)、薄荷醇组(于第6天加入1 mmol/L薄荷醇刺激)、IL-13+薄荷醇组(IL-13连续刺激6 d后加入1 mmol/L薄荷醇刺激),观察各组MUC5AC表达量、胞内Ca2+浓度和Bcl-2表达;予以Bcl-2抑制剂ABT-263、TRPM8离子通道特异性抑制剂BCTC干预,观察两者对各组MUC5AC的影响及BCTC对胞内Ca2+浓度、Bcl-2表达的影响。CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测各组细胞内Ca2+荧光强度,实时荧光定量PCR检测MUC5AC及Bcl-2m RNA水平,酶联免疫吸附法检测培养液中MUC5AC含量。结果 IL-13组、薄荷醇组、IL-13+薄荷醇组MUC5AC m RNA和蛋白的表达均明显高于对照组(P<0.05),且IL-13+薄荷醇组最高并于24 h达到最高峰(P<0.01);薄荷醇组、IL-13组、IL-13+薄荷醇组胞内Ca2+荧光强度、Bcl-2m RNA表达均明显高于对照组(P<0.05),且IL-13+薄荷醇组最高(P<0.01);予以BCTC干预后,薄荷醇组、IL-13+薄荷醇组胞内Ca2+荧光强度、Bcl-2m RNA、MUC5AC m RNA和蛋白表达水平均显著低于相应的未干预组(P<0.05),而IL-13组未发生明显变化(P>0.05);予以ABT-263干预后,各ABT-263干预组MUC5ACm RNA和蛋白表达水平均显著低于相应的未干预组(P<0.05)。结论 IL-13联合薄荷醇对于16HBE细胞MUC5AC的合成及分泌产生协同效应,其机制可能与TRPM8受体诱导的Bcl-2协同性增强有关。

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院