RNA干扰对大鼠血管内皮细胞血管紧张素转换酶表达的抑制作用

作者：何军华; 肖传实; 李茂莲; 边云飞

来源：中国心血管杂志, 2008, (03): 171-175+241.

• RNA干扰
• 内皮细胞
• 肽基二肽酶A RNA interference
• Endothelial cells
• Peptidyl-dipeptidase A

目的用RNA干扰技术选择性下调大鼠血管内皮细胞(ECs)上血管紧张素转换酶(ACE)的表达。方法构建携带ACE基因特异短发夹RNA(shRNA)编码序列的质粒载体pACE-shRNA,与脂质体转染剂制备成不同比例的复合物,转染原代培养的大鼠主动脉ECs,在荧光显微镜下检测转染效率,用四甲基氮唑盐比色法检测细胞存活率,选择出质粒与转染剂的最佳配比。然后以最佳配比复合物转染ECs,分别于转染前及转染后24、48、72h通过半定量RT-PCR和Western blot法检测ACE的表达。结果质粒与转染剂的最佳配比为质粒1.0μg、转染剂4μl,此时转染效率为(81.2±6.2)%,细胞生存率为(90...

• 单位
  山西医科大学第二医院