Hugl-1通过激活RhoA促进脑胶质瘤细胞的侵袭和迁移

作者：张宇; 桑奔; 朱贤龙; 于如同; 周秀萍^*

来源：中华神经外科杂志, 2018, 34(12): 1274-1280.

• 神经胶质瘤
• 肿瘤侵润
• 细胞迁移
• 人源幼虫巨大致死性基因编码蛋白
• pA GTP结合蛋白质

目的探讨人源幼虫巨大致死性基因编码的蛋白(Hugl-1)对人脑胶质瘤细胞侵袭、迁移的影响及其作用机制。方法应用脑胶质瘤U251和U87细胞设立过表达GFP组(对照组)和过表达GFP-Hugl-1组(Hugl-1组)。采用消化实验和贴壁实验检测细胞的黏附能力;以鬼笔环肽免疫荧光实验检测细胞骨架;采用划痕实验、Transwell实验以及明胶酶谱实验研究胶质瘤细胞的侵袭、迁移能力及其可能机制;以细胞组分分离、GST-pull down以及蛋白免疫印迹实验检测过表达Hugl-1对小G蛋白RhoA的水平与活性的影响。结果 (1)稳定表达Hugl-1的U251细胞较对照组细胞难以消化,贴壁速度更快,细胞聚团减少(P<0.05)。(2)血清剥夺再给予血清刺激后,与对照组细胞相比,Hugl-1组细胞的板状伪足伸展速度更快且更多。(3)Hugl-1组细胞的迁移与侵袭能力均高于对照组(均P<0.05)。其中,迁移实验显示,U251细胞Hugl-1组24 h的迁移细胞数量较对照组增加了(34±6)%(P <0.05);Transwell实验显示,U251和U87细胞中Hugl-1组的侵袭细胞数量分别较对照组增加了(30±7)%和(100±11)%(均P<0.05)。(4)明胶酶谱实验结果显示,过表达Hugl-1增加了MMP2的活性(P <0.05)。(5)过表达Hugl-1能促进U251细胞小G蛋白RhoA转位到细胞膜被激活(P<0.05)。(6)下调RhoA可降低U251细胞的侵袭能力(P<0.05),并能部分逆转Hugl-1促进U251细胞侵袭的作用(P<0.05)。结论 Hugl-1可通过调节小G蛋白RhoA促进脑胶质瘤细胞的侵袭和迁移。

• 单位
  徐州医科大学