摘要

目的:利用位点特异性聚合酶链式反应(PCR),建立一种能够快速鉴别当归药材及饮片中掺伪欧当归的方法。方法:通过比对当归和欧当归ITS基因序列,寻找单核苷酸多态性(SNP)位点并设计特异性鉴别引物。对影响特异性PCR反应的退火温度、引物浓度、循环数等条件进行优化,对掺伪不同比例和不同来源的当归掺伪样品进行了专属性、准确性和稳定性考察。结果:所建立的位点特异性PCR鉴别方法,在退火温度为63℃、引物循环数为30时,掺有欧当归的当归样品经过特异性引物扩增后,在250~500 bp之间检出一条单一DNA条带,而当归样品则无此条带。结论:该研究建立的位点特异性PCR方法能够准确地检测出当归药材及饮片中是否掺有欧当归,可作为当归质量监测的新手段。