摘要
目的观察TOP2α对前列腺癌细胞增殖能力的影响以及抑癌基因p53对TOP2α的调控能力。方法以Lipofectamine2000试剂转染针对p53和非特异性对照组的siRNA,干扰前列腺癌细胞C4-2中p53的表达,采用Realtime PCR和Western Blot检测细胞内TOP2α的mRNA和蛋白水平表达变化;采用质粒转染法在293T细胞中过表达p53后检测TOP2α蛋白水平的变化,明确p53对TOP2α表达的影响;采用BrdU标记法计算并检测干扰或过表达TOP2α表达后对前列腺癌细胞增殖能力的影响,明确TOP2α对前列腺癌细胞增殖的调节能力。结果干扰p53表达后细胞内TOP2αmRNA的表达明显升高,说明p53可以调节TOP2α的转录水平,进一步检测干扰p53表达后,TOP2α的蛋白水平表达明显升高;在细胞内,过表达p53后检测TOP2α的蛋白表达水平明显下降;在C4-2细胞中干扰目标基因TOP2α的表达后,增殖细胞的百分比从(21.54±1.443)%下降至(13.78±0.4736)%(P<0.05)。同时,在C4-2细胞中过表达TOP2α后,增殖细胞的百分比从(20.84±2.082%)上升至(33.36±3.244)%(P<0.05)。结论在前列腺癌细胞中,p53可以在mRNA和蛋白水平调节TOP2α的表达,TOP2α具有调节前列腺癌细胞增殖的能力。
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单位吉林大学第一医院; 吉林大学中日联谊医院