人源性中性内肽酶稳定转染细胞株的建立

作者：孔峰; 胡晓燕; 杨玲玲; 丁岩; 王丽娜; 崔行

来源：山东大学学报(医学版), 2006, 44(2): 118-121.

DOI：10.3969/j.issn.1671-7554.2006.02.003

• 中性内肽酶
• 阿尔茨海默病
• 基因治疗
• 转染
• 细胞转化
• 肿瘤

目的:获得中性内肽酶(NEP)及失活中性内肽酶(inNEP)稳定表达的细胞株.方法:用酶切及基因测序鉴定质粒pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V);以脂质体LipofectamineTM2000介导pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V)转染神经母细胞瘤细胞SK-N-SH,分别获得两者的稳定表达细胞株;用RT-PCR及Western blot分析NEP的表达.结果:转染4周后,可见G418单克隆抗性细胞株形成,转染pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V)的细胞NEP表达均增高.结论:获得稳定转染pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V)的细胞株.

• 单位
  山东大学