rAAV2/1-SR-BI-IRES-EGFP转染HepG2肝细胞对~(125)I-HDL摄取的调节

作者：孙润陆; 包金兰; 张舒媚; 黄灿霞; 张玉玲

来源：中山大学学报(医学科学版), 2016, 37(02): 202-209.

DOI：10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2016.0036

• B族I型清道夫受体
• 高密度脂蛋白
• 胆固醇逆转运
• HepG2肝细胞

【目的】探讨B族I型清道夫受体(SR-BI)过表达对高密度脂蛋白(HDL)摄取的调节,为SR-B1在胆固醇逆转运(RCT)及动脉粥样硬化(AS)中的研究提供新思路。【方法】用含SR-BI基因的重组腺相关病毒r AAV2/1-SR-BI-IRESEGFP杂合载体转染人Hep G2肝细胞株,Realtime RT-PCR和Western Blot分别检测转染后SR-BI m RNA和蛋白的表达。125I-HDL同位素标记观察转染对HDL结合的影响。激光共聚焦显微镜观察转染后SR-BI细胞分布及转移情况。【结果】与未转染组及对照病毒r AAV2/1-IRES-EGFP转染组相比,重组病毒r AAV2/1-SR-BI-IRES-EGFP转染组SR-BI m RNA水平和蛋白表达显著增加,差别均有统计学意义(P均<0.01),且可以引起125I标记的HDL与Hep G2肝细胞的结合增加1.28倍和1.40倍,差别均有统计学意义(P均<0.01)。在无血清状态下,我们用激光共聚焦显微镜观察发现SR-BI同时位于细胞膜和细胞浆,HDL可以促进SR-BI从细胞浆到细胞表面的转移。【结论】SR-BI过表达可以增加Hep G2肝细胞HDL的摄取且摄取可能主要发生在细胞膜上,SR-BI参与了RCT的过程。

• 单位
  中山大学孙逸仙纪念医院; 清远市人民医院