摘要
目的:通过小干扰RNA(siRNA)沉默NOK基因的转录表达,研究NOK基因在人脑胶质瘤细胞U251增殖、凋亡及侵袭中的调控作用。方法:合成NOK siRNA(si-578和si-996),脂质体转染U251细胞,qRT-PCR、Western blot检测其对NOK基因转录及表达的抑制效果,MTS法及平板克隆形成实验研究其对细胞增殖的影响,Transwell试验检测细胞迁移能力,Annexin V-FITC/7-AAD双染法检测细胞凋亡,Western blot检测Cyclin D1及AKT的蛋白表达。结果:si-578和si-996可显著降低NOK基因转录和表达(P<0.05)。抑制U251细胞NOK基因表达,可显著抑制细胞增殖和侵袭(P<0.05),凋亡细胞数量明显增加(P<0.05),G1期U251细胞数量显著增加(P<0.05),S期细胞明显减少(P<0.05),Cyclin D1表达和AKT磷酸化水平明显降低。结论:NOK在脑胶质瘤细胞的增殖、侵袭和凋亡过程中发挥重要调节作用。
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单位南京医科大学; 上海市东方医院; 同济大学附属东方医院