TRPV4通道介导慢性低氧肺高压大鼠肺微血管内皮通透性增加

作者：焦海霞; 袁胜霞; 黄燕珍; 苏巧文; 何瑞岚; 吴枝娟; 林默君^*

来源：生理学报, 2021, 73(06): 867-877.

DOI：10.13294/j.aps.2021.0079

• 肺高压
• 肺微血管内皮细胞
• 紧密连接
• 钙离子
• TRPV4

本文旨在研究瞬时受体电位香草素受体4 (transient receptor potential vanilloid 4, TRPV4)通道对慢性低氧肺高压(chronic hypoxia-induced pulmonary hypertension, CHPH)大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells, PMVECs)通透性的影响,以阐明CHPH发生时血管内皮功能障碍的可能机制。Sprague-Dawley大鼠慢性低氧处理21天建立CHPH模型,组织块贴壁法原代培养PMVECs,采用FITC-葡聚糖法检测细胞通透系数,透射电镜观察紧密连接(tight junction, TJ)结构,实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测TRPV4和TJ相关蛋白Occludin、Claudin-5、ZO-1表达变化,TRPV4特异性激动剂GSK1016790A (GSK, 10 nmol/L)和抑制剂HC-067047 (HC, 1μmol/L, 0.5μmol/L)干预后观察PMVECs内Ca2+浓度变化及其对PMVECs通透性的影响。结果显示:慢性低氧处理21天后成功建立CHPH大鼠模型,CHPH大鼠肺血管内皮间TJ结构破坏,PMVECs屏障功能降低,细胞间通透性增高,TJ相关蛋白表达显著减少,TRPV4表达增高(P<0.01)。特异性激活TRPV4后CHPH大鼠PMVECs内Ca2+浓度显著增高,TRPV4特异性抑制剂HC对CHPH大鼠细胞Ca2+增高的抑制效应显著高于正常PMVECs,并可以逆转CHPH大鼠PMVECs的通透性增高,增加三种TJ相关蛋白表达(P <0.01或P <0.05)。上述结果提示,TRPV4通道通过增加胞内Ca2+浓度,引起CHPH大鼠PMVECs上TJ结构破坏、TJ相关蛋白表达下降,诱发内皮功能障碍。

• 单位
  基础医学院; 福建医科大学; 福建医科大学附属泉州第一医院