摘要
目的利用本实验室已经建立的铁蛋白重链(ferritin heavy chain, FTH)敲除的前列腺癌PC-3细胞株,分析FTH表达降低引发的细胞内蛋白质变化,探讨FTH对前列腺癌(prostatic cancer, PC)病理生理过程的生物学影响。方法实验分为3组:空白对照组(未经处理的PC-3细胞),NC组(感染空载体病毒的阴性对照组),LV-sh FTH组(利用sh FTH病毒敲除FTH组)。Western blot实验确定FTH敲除效率后,利用质谱分析技术对感染细胞的蛋白表达情况进行检测,所得的质谱分析结果采用t检验进行差异分析(P<0.01,fold change>1.2),所得差异蛋白采用GO分析方法对差异蛋白质进行筛选分类及功能分析。结果对质谱分析结果中差异表达蛋白质进行GO分析,LV-sh FTH组与NC组相比,生物过程——RNA加工(RNA processing)中涉及的下调表达蛋白质最多共24个,分别为基因RPL8、WDR46、BOP1、RPL15、NOP56、UTP18、RS23、DDX27、PES1、UTP20、CDKN2A、DIS3、RPL6、RPL19、RPS8、RPL4、NOP58、UTP6、FCF1、DDX49、RCL1、UTP15、BMS1、IMP4所表达的产物。结论通过质谱分析鉴定出的差异蛋白结果,为后期验证FTH的生物学功能及为临床寻找新的前列腺癌早期诊断肿瘤标志物提供理论依据和基础。
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单位北京大学; 首都医科大学附属北京世纪坛医院