纳米材料Ac-αCD包装的Rab5a siRNA对肺微血管内皮细胞β-AR的调控作用

作者：孙欢^*; 朱伦刚

来源：四川医学, 2020, 41(03): 262-266.

DOI：10.16252/j.cnki.issn1004-0501-2020.03.008

• 纳米颗粒
• Rab5a
• siRNA
• β-AR
• 肺微血管内皮细胞

目的研究纳米材料缩醛化环糊精(acetalatedα-cyclodextrin,Ac-αCD)包装的Rab5a siRNA对肺微血管内皮细胞(Pulmonary Microvascular Endothelial cells,PMECs)β肾上腺素受体(β-Adrenergic Receptor,β-AR)的调控作用。方法设计合成5’端标记FITC的Rab5a siRNA序列,并由Ac-αCD组装成Ac-αCD-Rab5a siRNA的纳米颗粒处理大鼠肺微血管内皮细胞24h,同时用常规细胞转染试剂进行Rab5a siRNA转染细胞24h,激光共聚焦显微镜下比较细胞对Rab5a siRNA的摄取情况;分别利用RT-PCR、Western blotting检测Ac-αCD-Rab5a siRNA处理细胞0h、24h、48h后Rab5a的mRNA和蛋白表达;利用放射性配体结合受体试验检测Ac-αCD-NC siRNA组和Ac-αCD-Rab5a siRNA处理细胞48h后细胞表面β-AR表达情况;转染GFP标记的β2-AR质粒至内皮细胞,激光共聚焦显微镜下观察纳米系统对β2-AR细胞内定位的作用。结果纳米颗粒Ac-αCD-Rab5a siRNA可被细胞有效摄取,细胞内可见大量呈颗粒状均匀分布的绿色荧光颗粒;Ac-αCD-Rab5a siRNA可显著下调目的基因mRNA和蛋白表达水平; Ac-αCD-Rab5a siRNA可增加细胞膜表面β-AR表达;Ac-αCD-Rab5a siRNA可使β2-AR在细胞内定位发生改变。结论纳米材料Ac-αCD包装的Rab5a siRNA能被PMECs有效摄取,从而调控β-AR在细胞膜表面的表达和细胞内的定位。

• 单位
  绵阳市中心医院