滩羊肌内前体脂肪细胞的分离培养及分化相关基因的表达规律研究

作者：徐小春; 陈文娟; 赵瑞; 马森^*

来源：家畜生态学报, 2020, 41(11): 35-41.

• 滩羊
• 肌内前体脂肪细胞
• 诱导分化
• 成脂基因

研究旨在建立滩羊肌内前体脂肪细胞的体外培养体系,并探讨其在诱导分化过程中成脂关键基因的表达规律。采集10日龄滩羊背最长肌组织,用Ⅱ型胶原酶消化分离肌内前体脂肪细胞,进行细胞的原代、传代培养和形态学观察,继而对获得的细胞进行诱导分化和油红O染色鉴定。同时,采用qRT-PCR检测参与前体脂肪细胞成脂分化的关键基因PPARγ、C/EBPα、FAS、aP2、LPL mRNA在诱导第0、2、4、6、8 d的表达水平变化。结果表明:(1)滩羊原代肌内前体脂肪细胞在分离后约4 h时开始贴壁,贴壁的细胞呈现为小梭形与不规则三角形。经过传代后,细胞成分均一并且贴壁良好,呈现成纤维细胞样形态;细胞传代第2～6 d为指数生长期,其生长曲线近似"S"形;(2)细胞诱导分化第8天时,油红O染色呈红色,细胞具有前体脂肪细胞的典型特征;(3)PPARγ和FAS的表达水平在第6天时最高,随着诱导时间增长PPARγ表达先升高后降低,FAS表达先降低后升高再降低;C/EBPα、aP2和LPL的表达量在第4 d最高,随着诱导分化时间增长,C/EBPα和LPL表达先升高后降低,aP2表达先升高后降低再升高。

• 单位
  北方民族大学; 动物科技学院; 河南农业大学