喉癌来源的MAGE-A3基因真核表达载体及其稳定表达模型的构建和鉴定

作者：吉晓滨; 吕景礼; 陈敬贤; 刘启才; 谢景华

来源：广州医学院学报, 2012, (02): 6-10.

• 黑色素瘤抗原编码基因
• 真核表达
• 基因克隆
• 喉肿瘤 melanoma antigen-encoding gene
• eukaryotic expression
• gene cloning
• laryngocarcinoma

目的:克隆人黑色素瘤相关抗原MAGE-A3基因,构建真核表达载体,检测、鉴定其在细胞中的表达。方法:MAGE-A3基因进行PCR扩增,凝胶回收PCR产物片段并连接至pMD18-T载体。测序后将MAGE-A3基因片段亚克隆至真核表达载体,构建成pIRES2-EGFP/MAGE-A3重组质粒经脂质体转染至293T细胞株后,荧光定量PCR、Western-blotting法鉴定MAGE-A3基因的表达。结果:MAGE-A3基因正确克隆在pIRES2-EGFP/MAGE-A3,测序结果与GenBank公布的MAGE-A3序列一致。转染293T细胞后能检测到MAGE-A3基因和蛋白的表达。结论:成功构建...

• 单位
  广州市第一人民医院; 广州医科大学; 哥伦比亚大学