细胞酸化对K562/A02耐药细胞株中P-糖蛋白的影响

作者：芦颖; 李庆华; 马丽; 李彬; 袁文肃; 茹永新; 王建祥; 庞天翔

来源：中国实验血液学杂志, 2009, 17(03): 568-573.

• 细胞酸化
• 细胞内pH值
• P-糖蛋白
• 多药耐药

本研究探讨细胞酸化对K562/A02细胞中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的影响,为抗白血病多药耐药(multidrug resistance,MDR)提供新方法。利用高钾缓冲液对细胞进行酸化,应用激光共聚焦显微镜测定K562及K562/A02细胞内pH值(intracellularp H,pHi);采用MTT法观察细胞酸化对细胞活力的影响;应用流式细胞术检测细胞酸化对K562/A02细胞中P-gp功能的影响;分别采用Western blot及实时定量RT-PCR技术检测P-gp的蛋白表达水平和mRNA表达水平的变化。结果表明:细胞酸化3小时对K562及K562/A02细胞的活力影响较小。在K562/A02细胞中,P-gp的功能随pHi的降低而减弱,细胞酸化明显增加了细胞对罗丹明123(Rhodamine123,Rh123)的累积,并抑制了P-gp介导的Rh123外排。细胞酸化还分别在蛋白水平和mRNA水平抑制了K562/A02细胞中P-gp的表达,并且这种抑制具有pHi及时间的依赖性。结论:细胞酸化能够抑制K562/A02耐药细胞株中P-gp的表达和功能。

• 单位
  中国医学科学院; 北京协和医学院; 实验血液学国家重点实验室