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摘要
目的：探讨驱动蛋白家族成员20A(KIF20A)对结直肠癌（CRC）恶性行为和化疗耐受的影响及其机制。方法：12例CRC及配对正常肠黏膜组织样本获自南方医科大学南方医院病理科。免疫组化、Western blot和RT-qPCR分析CRC组织和癌旁组织中KIF20A表达水平。KIF20A短发夹RNA(sh-KIF20A)转染或KIF20A过表达慢病毒（LV-KIF20A）感染CRC细胞。将RKO或LOVO细胞分为MOCK组（未转染的RKO或LOVO细胞）、LV-NC组（对照慢病毒感染RKO或LOVO细胞）和LV-KIF20A组（LV-KIF20A感染RKO或LOVO细胞）；将HCT-116细胞分为MOCK组（未转染的HCT-116细胞）、sh-NC组（对照shRNA转染HCT-116细胞）和sh-KIF20A组（sh-KIF20A转染HCT-116细胞）。CCK-8和集落形成实验检测细胞活力和集落形成能力；流式细胞术检测细胞凋亡；Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、Bax和Bcl-2及JAK2/STAT3信号通路相关蛋白的表达。免疫组化检测化疗敏感的CRC组织和化疗不敏感CRC组织中KIF20A和p-STAT3蛋白水平。将LV-NC或LV-KIF20A感染的RKO细胞接种于BALB/c裸鼠右侧皮下（每组5只），检测KIF20A对肿瘤体内生长的影响。结果：KIF20A在CRC组织及细胞中显著上调（P<0.05）。敲减KIF20A抑制CRC细胞的活力和集落形成能力，而过表达KIF20A则促进CRC细胞活力和集落形成能力。在5-氟尿嘧啶处理下，敲减KIF20A促进cleaved caspase-3和Bax表达，抑制Bcl-2表达，促进细胞凋亡；而过表达KIF20A会抑制cleaved caspase-3和Bax表达，促进Bcl-2表达，抑制细胞凋亡。机制研究表明，过表达KIF20A可上调p-JAK2和p-STAT3水平并激活JAK2/STAT3通路，KIF20A沉默可下调p-JAK2和p-STAT3水平。沉默STAT3可逆转由KIF20A过表达引起的细胞增殖能力提高和凋亡减少。与化疗敏感的CRC组织相比，KIF20A和pSTAT3在化疗不敏感的CRC组织中表达水平更高。体内实验表明，KIF20A过表达促进CRC肿瘤生长（P<0.05）。结论：KIF20A通过激活JAK2/STAT3信号通路调节CRC的恶性增殖及化疗耐受。
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