摘要
目的:探讨体外共培养体系中肝癌Huh7和HCC-LM3细胞对RANKL诱导破骨细胞(OC)分化的影响。方法:通过体外分离和培养C57小鼠原代骨髓巨噬细胞(BMMs),建立间接接触肝癌细胞共培养体系和肝癌细胞条件培养液共培养体系,分为对照组(BMMs)、Huh7组(BMMs+Huh7)和HCC-LM3组(BMMs+HCC-LM3),观察其对RANKL诱导OC分化的影响;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察OC的数量和铺展率;实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测OC相关基因mRNA的表达。结果:与对照组相比,Huh7组和HCC-LM3组TRAP阳性的多核OC明显减少;加入肝癌细胞条件培养液Huh7组和HCCLM3组中,OC的数量和铺展率均明显降低(P<0.01),OC相关基因CTSK、NFATc1、TRAP、DC-STAMP、V-ATPase-d2、VATPase-a3、c-fos的mRNA的表达水平均明显降低(P<0.05)。结论:在间接接触肝癌细胞和其条件培养液共培养体系中,Huh7和HCC-LM3细胞可以抑制RANKL诱导OC的分化。
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