内侧前额叶皮质小胶质细胞P2X7受体在大鼠神经病理性痛中的作用：与自噬的关系

作者：黄逸菲; 钟琦; 李婷婷; 陈婷; 曹玥; 陈畅; 张宗泽^*

来源：中华麻醉学杂志, 2021, 41(12): 1485-1490.

DOI：10.3760/cma.j.cn131073.20211005.01218

• 额叶前皮质
• 小神经胶质细胞
• 受体, 嘌呤能P2X7
• 神经痛
• 自噬

目的评价内侧前额叶皮质(mPFC)小胶质细胞P2X7受体在大鼠神经病理性痛中的作用及其与自噬的关系。方法 SPF级健康成年雄性SD大鼠64只, 6～8周龄, 体重200～250 g, 采用随机数字表法分为4组(n=16):假手术组(S组)、神经病理性痛组(NP组)、假手术+P2X7受体阻断组(SP组)和神经病理性痛+P2X7受体阻断组(NP+P组)。采用坐骨神经干结扎法制备大鼠神经病理性痛模型, 14 d后通过脑立体定位仪于内侧前额叶皮质置入套管, SP组和NP+P组第14天开始连续3 d双侧mPFC注射P2X7受体阻断剂A-740003 0.5 μg/0.5 μl, S组和NP组第14天开始连续3 d双侧mPFC注射二甲基亚砜0.5 μl。于造模后3、7、10 d及14、15、16 d给药后30 min时, 测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。随后处死大鼠取mPFC, 采用qRT-PCR法检测P2X7受体mRNA的表达, 采用Western blot法检测P2X7受体、自噬相关蛋白Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ的表达, 采用免疫荧光法检测P2X7受体与Iba-1共表达情况, 透射电镜下观察并计数mPFC自噬体。结果与S组比较, NP组和NP+P组造模后3、7和10 d时MWT降低, TWL缩短, 造模后16 d给药后30 min时P2X7受体及其mRNA、Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ表达上调, P2X7受体与Iba-1共表达细胞数和自噬体数增加(P<0.05), SP组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与NP组比较, NP+P组造模后14、15和16 d给药后30 min时MWT升高, TWL延长, 造模后16 d给药后30 min时P2X7受体及其mRNA、Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ表达下调, P2X7受体与Iba-1共表达细胞数和自噬体数减少(P<0.05)。结论 mPFC小胶质细胞P2X7受体表达上调参与了大鼠神经病理性痛的过程, 与促进自噬有关。

• 单位
  武汉大学中南医院