细粒棘球绦虫AgB8/1-AgB8/2重组嵌合抗原表达系统的构建

作者：古力帕丽·麦曼提依明; 马海梅; 吾拉木·马木提; 陈洁; 陈璐; 丁剑冰; 马秀敏; 温浩

来源：中国人兽共患病学报, 2011, (06): 502-505+510.

• 细粒棘球绦虫
• AgB8/1-AgB8/2重组嵌合抗原
• 原核表达质粒 Echinococcus granulosus
• AgB8/1-AgB8/2 recombinant chimeric antigen
• prokaryotic expression plasmid.

目的构建pET32a-AgB8/1-AgB8/2原核表达载体,并对其重组蛋白进行原核细胞表达。方法从细粒棘球绦虫原头蚴中提取总RNA,反转录生成cDNA,以此cDNA为模板,用基因特异性引物分别扩增EgAgB8/1和EgAgB8/2基因编码其分泌型多肽的片段,经测序后,以此两条基因片段为依据,人工合成EgAgB8/1-EgAgB8/2嵌合抗原编码核酸序列,将其克隆至pUCm-T载体,测序鉴定其正确性。通过对pUCm-T/AgB8/1-AgB8/2重组质粒进行双酶切,将获得的AgB8/1-AgB8/2嵌合抗原编码核酸序列用定向克隆技术克隆至原核表达质粒pET32a上,测序鉴定插入片段正确后,转化...

• 单位
  新疆医科大学第一附属医院; 新疆医科大学