摘要

为研究天冬氨酸-谷氨酸-丙氨酸-组氨酸盒解旋酶9(DEAH(Asp-Glu-Ala-His)-box helicase 9,DHX9)对牛骨骼肌细胞增殖与分化的影响,利用已经建立的牛骨骼肌卫星细胞体外成肌分化模型,设计合成DHX9的si-RNA,采用荧光定量PCR和Western blot技术检测DHX9基因在成肌分化前后以及增殖标志因子配对盒基因7(paired box 7, Pax7)、分化标志因子肌球蛋白重链(myosin heavy chain, MyHC)与肌细胞生成素(myogenin, MyoG)的mRNA与蛋白表达水平。结果显示:干扰后,DHX9在牛骨骼肌分化后表达量极显著下降(P<0.01);与对照组相比,增殖标志因子Pax7的mRNA水平和蛋白水平无显著变化(P>0.05),EdU阳性细胞率无变化(P>0.05),MyHC、MyoG的mRNA水平和蛋白水平均极显著升高(P<0.01);倒置显微镜观察发现肌管明显变粗。结果表明:干扰DHX9后对牛骨骼肌卫星细胞的增殖无影响,但能够促进牛骨骼肌卫星细胞的成肌分化过程,研究结果为进一步深入研究DHX9在动物骨骼肌发育分化调控机制方面提供参考。