超声破裂载基因微泡增强心肌细胞受磷蛋白反义RNA转染

作者：汪国忠; 柳景华; 吕树铮; 郭成军; 张英川; 苑飞; 宋现涛; 周渊; 葛长江

来源：中华超声影像学杂志, 2010, 19(10): 897-900.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1004-4477.2010.10.026

• 超声检查
• 微气泡
• RNA
• 反义
• 转染
• 受磷蛋白

目的 探讨超声破裂载基因微泡增强心肌细胞反义RNA转染与表达的效应.方法 构建受磷蛋白(phospholamban,PLB)反义RNA真核表达质粒PcDNA 4.1-asPLB,采用磷酸钙共沉淀、超声辐照及超声破裂载基因微泡等方法介导反义RNA转染.采用RT-PCR及Western blot检测心肌细胞PLB、肌浆网钙ATP酶(sarcoplasmic retculum Ca2+ATPase,SERCA2a)mRNA和蛋白表达水平,观察不同方法介导PLB反义RNA转染对心肌细胞PLB及SERCA2a表达的影响.结果 与空载体PcDNA4.1比较,PcDNA4.1-asPLB能特异地抑制心肌细胞PLB表达(P＜0.05).超声破裂载基因微泡明显增强反义RNA转染与表达,与其他转染组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).PcDNA4.1-asPLB对SERCA2a表达无明显影响,但降低PLB/SERCA2a比值.结论 超声破裂载基因微泡是一种高效的反义RNA转染方法,其介导PcDNA4.1-asPLB转染能明显抑制心肌细胞PLB表达.

• 单位
  首都医科大学附属北京安贞医院