蛴螬提取物对兔光损伤视网膜变性Caspase 8、Bax、Bid及Caspase 3表达的影响

作者：蒋鹏飞; 彭俊; 吴大力; 彭清华^*

来源：中华眼科医学杂志(电子版), 2019, 9(02): 83-89.

• 蛴螬提取物
• 光损伤
• 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8
• 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
• B细胞淋巴瘤-2相关的x蛋白
• B细胞淋巴瘤-2同源区域3凋亡诱导蛋白

目的探讨蛴螬提取物对兔光损伤视网膜变性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8(Caspase 8)、B细胞淋巴瘤-2相关的x蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2同源区域3凋亡诱导蛋白(Bid)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3)表达的影响。方法将30只实验性兔随机分成空白组、模型组、蛴螬低剂量组、蛴螬中剂量组及蛴螬高剂量组。每组6只兔(12只眼)。除空白组外,其余四组均建立光损伤视网膜变性模型,在光照架的6个面分别放置1根40瓦的白色荧光灯管,调节光照强度,并用ZDS-10型数字式照度计测定兔活动水平。多点照度平均为(2000±200)Lx,在12 h明及12 h暗环境下循环光环境适应7 d,自由摄食饮水。7 d后光照前先暗适应24 h,然后光照12 h,再进行暗适应12 h,连续3个循环,光照时间总计为36 h。成模后,给予空白组、模型组生理盐水5 ml/kg灌胃,蛴螬低剂量组以0.45 g/kg(中剂量组以0.9 g/kg、高剂量组以1.8 g/kg)蛴螬提取物配成5 ml蛴螬提取物混悬液灌胃。在给药14 d处死全部兔后取材做苏木精-伊红染色,观察视网膜细胞结构及免疫组化检测Caspase 8、Bax、Bid及Caspase 3的表达。Caspase 8、Bax、Bid及Caspase 3表达的积分光密度值,以均数±标准差表示。采用单因素方差分析比较不同组别Caspase 8、Bax、Bid及Caspase 3表达水平的差异,当差异有统计学意义时,进一步采用SNK法两两比较。结果视网膜显微形态学观察结果显示,空白组兔视网膜结构层次分明,各层细胞排列整齐规则,细胞染色均匀且形态规整;模型组兔视网膜层次结构模糊,分界不清,出现不规则淡染,细胞排列紊乱,细胞数目减少;蛴螬低剂量组兔视网膜外核层胞核排列较疏松;蛴螬中剂量组兔视网膜外核层增厚,视网膜外核层胞核排列较整齐密集;蛴螬高剂量组兔视网膜外核层胞核排列较整齐,厚度有所增加。空白组视网膜外核层细胞浆中Caspase 8、Bax、Bid及Caspase 3阳性物质分布稀疏,含量较少;模型组视网膜外核层细胞浆中Caspase 8、Bax、Bid及Caspase 3阳性物质弥漫分布,含量较多。空白组和模型组的Caspase 8、Bax、Bid及Caspase 3表达与蛴螬各组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。蛴螬中剂量组Caspase 8、Caspase 3表达与蛴螬低剂量组相比,差异有统计学意义(F=7.30,5.43;P<0.05);蛴螬中剂量组Bid、Bax表达与蛴螬低剂量组相比,差异无统计学意义(F=2.47,5.79;P>0.05)。蛴螬高剂量组Caspase 8、Bax、Bid及Caspase 3表达与蛴螬低剂量组相比,差异均无统计学意义(F=0.11,0.11,0.95,0.01;P>0.05)。蛴螬中剂量组Caspase 8表达与蛴螬高剂量组相比,差异有统计学意义(F=6.14,P<0.05);蛴螬中剂量组Bax、Bid及Caspase 3表达与蛴螬高剂量组相比,差异均无统计学意义(F=0.11,0.79,1.71;P>0.05)。结论蛴螬提取物能够抑制Caspase 8、Bax、Bid及Caspase 3的表达,不同剂量效果有差异,蛴螬中剂量组效果较好。

• 单位
  广西中医药大学第一附属医院; 湖南中医药大学第一附属医院; 湖南中医药大学