靶向SDF-1通过调控肿瘤相关巨噬细胞亚型增强结直肠癌化疗敏感性的作用

作者：陈茹; 刘洪伯; 马丽丽^*

来源：西部医学, 2023, 35(01): 57-71.

• 基质细胞衍生因子-1
• 结直肠癌
• 化疗敏感性
• 肿瘤相关巨噬细胞

目的 探究靶向基质细胞衍生因子-1(SDF-1)调控肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)亚型转化增强结直肠癌(CRC)化疗敏感性的作用。方法 使用PMA和IL-4体外诱导THP-1细胞为TAMs细胞，流式细胞仪检测M1/M2型特异表面标志物CD86和CD206表达；使用5μg/mL SDF-1抑制剂AMD3100处理TAMs细胞24 h,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测SDF-1表达，qRT-PCR检测iNOS、TNF-α、TGF-β及Arg-1表达；建立人结直肠癌细胞LoVo和TAMs细胞共培养体系，并使用不同浓度0、0.5、5、50、500μmol/L奥沙利铂处理LoVo细胞，具体分组包括空白对照组、奥沙利铂组、TAMs+奥沙利铂组、AMD3100+TAMs+奥沙利铂组，CCK-8法检测LoVo细胞存活率；构建动物结直肠癌移植瘤模型，待肿瘤长出后选择肿瘤大小为100 mm3的12只裸鼠，按随机数字表法分为对照组、奥沙利铂组、AMD3100+奥沙利铂组，每组4只，奥沙利铂组腹腔注射8 mg/kg奥沙利铂，AMD3100+奥沙利铂组腹腔注射5 mg/kg SDF-1抑制剂AMD3100和8 mg/kg奥沙利铂，对照组注射等体积生理盐水，每日一次，持续18 d,首次给药后的第0、3、6、9、12、15、18 d测量裸鼠肿瘤体积，18 d解剖取肿瘤组织并称重，制备肿瘤组织单细胞悬液，流式细胞仪分选M1/M2型巨噬细胞，免疫组织化学染色检测iNOS和Arg-1表达。结果 体外成功诱导获得TAMs细胞，经过SDF-1抑制剂AMD3100处理后，TAMs细胞中SDF-1在mRNA和蛋白上的表达水平均下调，iNOS、TNF-α的mRNA相对表达量升高，TGF-β、Arg-1的mRNA相对表达量降低(P<0.01);0.5、5、50、500μmol/L奥沙利铂处理后LoVo细胞存活率下降，与TAMs共培养再经过奥沙利铂处理后LoVo细胞存活率升高，而与SDF-1抑制剂AMD3100处理的TAMs共培养再经过奥沙利铂处理后LoVo细胞存活率则下降(P<0.01);经过奥沙利铂处理的移植瘤裸鼠肿瘤组织生长减缓，肿瘤重量减小，经过SDF-1抑制剂AMD3100和奥沙利铂联合处理的移植瘤裸鼠肿瘤组织生长进一步减缓，肿瘤重量减小，同时，肿瘤组织中F4/80+CD11c+表达增加，iNOS表达增加，F4/80+CD206+表达减少，Arg-1表达也减少。结论 通过SDF-1抑制剂AMD3100靶向SDF-1可在体外、体内增强结直肠癌的化疗敏感性，其作用机制可能与调控肿瘤相关巨噬细胞M1/M2亚型转化相关。

• 单位
  新疆维吾尔自治区人民医院