结核分枝杆菌Rv2461c基因的克隆、表达、纯化及其抗原性的初步检测

作者：王庆忠; 张鹭; 马国举; 廖海印; 王洪海

来源：现代生物医学进展, 2008, (08): 1445-1448.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2008.08.020

• 结核分枝杆菌
• clpP蛋白
• Rv2461c
• 蛋白表达
• 亚细胞定位 Mycobacterium tuberculosis
• clpP
• Protein Expression
• Subcellular localization

目的:探索结核分枝杆菌Rv2461c基因编码的clpP蛋白作为结核检测抗原的可行性。方法:克隆结核分枝杆菌clpP蛋白的编码基因Rv2461c,构建pET30a-Rv2461c重组质粒,并将其成功的转化到大肠杆菌JF1125克隆载体中,测序鉴定结果正确。将pET30a-Rv2461 c重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,表达纯化目的蛋白进行质谱分析.制备clpP蛋白的多克隆抗体,通过亚细胞分离及Western检测分析蛋白的亚细胞定位,纯化的clpP蛋白通过间接ELISA实验进行抗原性的初步检测。结果:结核分枝杆菌clpP蛋白大量存在于细胞质中,少量存在于细胞壁和细胞膜中。重组抗原在检测肺结核病人...

• 单位
  复旦大学; 生命科学学院; 上海市临床检验中心; 齐齐哈尔大学; 遗传工程国家重点实验室