加减驻景方含药血清对AKT基因转染后ARPE-19细胞表达VEGF的影响

作者：褚文丽; 陈水龄; 亢泽峰^*; 张丛青; 李维义; 刘健

来源：医学研究杂志, 2018, 47(12): 55-59.

• 加减驻景方
• 含药血清
• ARPE-19细胞
• 基因转染
• 血管内皮生长因子

目的探讨加减驻景方含药血清对AKT基因转染后人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)细胞表达VEGF的影响。方法制备SD大鼠加减驻景方含药血清及空白血清,建立AKT基因转染ARPE-19细胞模型,体外培养,分为5个组,正常组为ARPE-19细胞常规培养,转染模型组(模型细胞,常规条件培养),含药血清组(模型细胞,给予含药血清干预培养)、空白血清组(模型细胞,给予空白血清干预培养)和阳性对照组(模型细胞,给予康柏西普干预培养)。设立不同时间和不同浓度,通过CCK-8法检测各组血清及阳性组药物对细胞毒性、增殖的影响;通过ELISA检测各组细胞上清液中VEGF的表达。结果蛋白质印迹法(Western blot)显示,转染模型组与正常组比较,AKT蛋白的表达量明显增加,差异有统计学意义(P <0.05)。CCK-8示,细胞培养24、48h后,AKT基因转染可促进ARPE-19细胞增殖(P<0. 05),培养72h后,对细胞增殖影响不大(P> 0.05)。10、20μg/ml康柏西普及5%、10%的含药血清对模型细胞的增殖有抑制作用(P <0. 05),各浓度空白血清组对模型细胞组的增殖影响不大(P>0. 05)。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测显示:转染模型组细胞上清液中VEGF表达量高于正常组(P<0. 05),康柏西普组与含药血清组均显著低于模型组(P <0.05),其中康柏西普组低于含药血清组,差异有统计学意义(P<0. 05)。空白血清组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0. 05)。结论 AKT基因转染后可诱导ARPE-19细胞的增殖,促进VEGF的表达。加减驻景方含药血清对AKT基因转染后ARPE-19细胞的增殖及VEGF的表达有抑制作用。加减驻景方可能通过抑制VEGF的过度表达发挥干预CNV生成的作用。

• 单位
  中国中医科学院眼科医院