外泌体的不同染色方法效果比较

作者：朱艳; 张雷; 周晨明; 闫静; 孟丽^*

来源：河北医科大学学报, 2019, 40(09): 1068-1071.

• 外泌体
• 负染色
• 透射电镜

目的通过用四氧化锇、磷钨酸、钼酸铵和醋酸双氧铀4种染液分别对外泌体负染色,并对染色效果进行观察和对比分析,以期选出对外泌体染色效果最好的负染液。方法用差速离心法提取外泌体后,采用漂浮法分别用四氧化锇、磷钨酸、钼酸铵、醋酸双氧铀4种不同染液对外泌体进行负染色,透射电镜观察,从外泌体的杯托状或圆盘状结构清晰度、膜边缘锐利与否、染色背景干净程度、反差效果等方面对比4种染液的效果。结果四氧化锇的染色背景出现大量泡状结构,外泌体结构不明显。磷钨酸对外泌体的染色效果不如醋酸双氧铀和钼酸铵,外泌体的胞膜边缘不清晰,染色背景有杂质。钼酸铵对外泌体的染色效果也较好,其囊泡的膜结构较清楚,外泌体的杯托状结构可较清楚见到,但是反差较弱。醋酸双氧铀染色下,外泌体典型的杯托状或圆盘状结构清晰可见,膜边缘锐利,染色背景干净,反差效果佳。结论醋酸双氧铀对外泌体的染色效果最好,是最合适的负染染液。

• 单位
  河北医科大学; 基础医学院