花生AhPLDα基因植物过表达载体构建及对拟南芥的遗传转化

作者：刘义杰; 陈四龙; 程增书; 王瑾; 宋亚辉; 郝军会; 张朋娟; 李玉荣

来源：华北农学报, 2016, (06): 31-38.

• 花生
• AhPLDα基因
• 植物表达载体
• 转基因
• 干旱胁迫信号 Peanut
• AhPLDα gene
• Plant expression vector
• Transgene
• Drought stress signaling

为了明确花生AhPLDα基因在响应干旱胁迫信号传导中的功能和作用机制,以ABA处理的冀花4号花生叶片c DNA为模板,用RT-PCR方法扩增AhPLDα1和AhPLDα2的全长CDS片段,采用酶切-连接的方法分别将这2个基因定向克隆到植物表达载体p Bar-F3上,冻融法将重组子转入根癌农杆菌GV3101,利用改良Floral-dip法将过表达质粒转入拟南芥。菌落PCR和酶切结果表明,Ca MV35S启动子驱动的过表达载体重组质粒p Bar-AhPLDα构建正确。通过RT-PCR和qRT-PCR验证,表明AhPLDα1和AhPLDα2基因整合到拟南芥基因组中并能过量表达,获得了阳性转基因纯合株...

• 单位
  河北省农林科学院粮油作物研究所