釉原蛋白基因启动子的克隆及在不同细胞中转录调控的分析

作者：朱庆林; 吴补领; 余擎; 孔辉; 郭婷; 费俭; 王铸钢

来源：上海口腔医学, 2005, (04): 402-406.

• 釉原蛋白
• 启动子
• 转录调控
• 报告基因
• 荧光素酶 Amelogenin
• Promoter
• Transcription regulation
• Report gene
• Luciferase

目的:克隆釉原蛋白基因启动子及可能影响转录调控的序列,分析其在不同细胞中的转录模式。方法:检索并分析釉原蛋白基因的上游调控序列。利用PCR及酶切方法,从小鼠C57BL/6J基因组上扩增不同长度(包括基本启动子区域)的转录调控序列,与PGL3-Basic载体的虫荧光素酶基因连接。瞬时转染CHO、Hela、UMR-106细胞,检测荧光素酶的活性,分析不同长度的启动子片段在各种细胞中的转录活性。结果:共构建了6个不同长度的报告载体,瞬转后发现在Hela细胞中有较强的荧光素酶活性,在CHO、UMR-106细胞中活性很弱。在不同的细胞内,启动子活性随片段长度变化,其变化趋势有明显的相似性。表现为在转录起...

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学; 上海南方模式生物研究中心