利什曼原虫K26序列应用于我国利什曼原虫分离株鉴定的价值分析

作者：刘建秀; 高春花; 杨玥涛; 郑彬; 汪俊云^*

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2020, 38(02): 181-187.

• 利什曼病
• 利什曼原虫
• 分离株
• K26
• 系统进化树
• 中国

目的评价利什曼原虫K26序列应用于我国利什曼原虫分离株鉴定的价值。方法收集我国不同流行区的利什曼原虫16个分离株和6个国际参照株,培养后收集前鞭毛体,提取DNA,扩增K26序列并测序,应用ClustalX2进行序列比对,从GenBank下载同源性较高的利什曼原虫分离株的K26序列,构建系统进化树,分析我国不同流行区的利什曼原虫分离株的亲缘关系。结果我国16个利什曼原虫分离株和国际参照株DD8均扩增出单一条带,而5个非杜氏利什曼原虫复合体虫株均未扩增出任何条带。序列分析结果表明,我国人源型利什曼病流行区的3个分离株801、 KS-2和KS-6均扩增出920 bp片段,自然疫源型利什曼病流行区的4个分离株XJ771、 JIASHI-1、 JIASHI-2和JIASHI-5均扩增出491 bp片段,人犬共患型利什曼病流行区4个分离株Cy、 SC6、 Hebei-Lv和Shanxi-Yang均扩增出404 bp片段,皮肤利什曼病流行区的5个分离株KXG-Xu、 KXG-Liu、KXG-65、 KXG-918和KXG-927均扩增出449 bp片段,且各流行区内虫株间的序列一致性均为100%。各流行区之间的虫株间的序列一致性较低,为40.2%～91.4%。系统进化树分析结果显示,我国16个利什曼原虫分离株聚集成2个群3个亚群,其中KXG-Xu、 KXG-Liu、 KXG-65、 KXG-918、 KXG-927、 XJ771、 JIASHI-1、 JIASHI-2、JIASHI-5分离株聚集为A亚群,Cy、 SC6、 Hebei-Lv、 Shanxi-Yang与婴儿利什曼原虫聚集为B亚群,A亚群和B亚群聚集为Ⅰ群;801、 KS-2和KS-6分离株与杜氏利什曼原虫聚集为C亚群,进一步与国际参照株DD8聚集为Ⅱ群。结论利什曼原虫K26序列可应用于我国利什曼原虫分离株的鉴定。

• 单位
  中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所; 科技部国家级热带病国际联合研究中心; 卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室