科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的观察微小RNA(miR-222-3p)在高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染宫颈癌组织中的表达情况,探讨其对HPV感染的宫颈癌细胞凋亡和同源结构域相互作用蛋白激酶2(HIPK2)通路的影响。方法:收集本院HPV阳性宫颈癌组织标本、HPV阴性宫颈癌组织标本及正常宫颈组织标本各10份,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qT-PCR)及免疫组化法检测标本中miR-222-3p及HIPK2表达水平。取HPV感染的Siha细胞随机分为对照组、miR-222-3p低表达(Si-miR-222-3p)组、miR-222-3p低表达阴性对照(si-NC)组、HIPK2高表达组(Ad-HIPK2)组、HIPK2高表达阴性对照(Ad-NC)组。各组转染后,用qT-PCR法检测miR-222-3p及HIPK2 mRNA表达水平;噻唑蓝法检测细胞增殖率,流式细胞仪分析细胞凋亡率;Western blot检测HIPK2及其下游相关凋亡蛋白(capase-3)、P53、P57、促凋亡蛋白Bax的表达。将Si-miR-222-3p与HIPK2低表达腺病毒(si-pcD-HIPK2)共转染细胞,分为Si-miR-222-3p+si-pcD-HIPK2组、si-NC+si-pcD-HIPK2组、Si-miR-222-3p+si-pcD-NC组、si-NC+si-pcD-NC组及对照组,检测各组细胞miR-222-3p、HIPK2 mRNA表达及凋亡率变化。结果与正常宫颈组织(1.08±0.09、1.01±0.08)相比,HPV阳性及阴性宫颈癌组织标本miR-222-3p(1.62±0.15及2.26±0.25)及HIPK2(2.42±0.26及1.66±0.24)表达均升高(P<0.05);与HPV阴性宫颈癌组织相比,HPV阳性宫颈癌组织miR-222-3p表达升高(P<0.05),HIPK2表达降低(P<0.05)。与对照组(10.01±0.60、1.61±0.16、1.09±0.12、1.07±0.09、1.06±0.10、1.05±0.09、100.00±0.00、2.28±0.21)比较,si-miR-222-3p组及Ad-HIPK2组细胞凋亡率(31.29±3.35及32.33±3.24)及HIPK(2.62±0.25及2.76±0.27)、capase-3(1.83±0.18及1.86±0.18)、P53(1.75±0.17及1.79±0.16)、P57(1.80±0.15及1.94±0.19)、Bax(1.96±0.19及1.94±0.18)蛋白表达升高(P<0.05),增殖率(71.42±7.15及72.46±7.26)降低(P<0.05);si-miR-222-3p组miR-222-3p(1.42±0.15)表达降低(P<0.05),Ad-HIPK2组miR-222-3p(2.46±0.26)表达无显著变化(P<0.05);Si-NC组及Ad-NC组上述指标与对照组相比差异无统计学意义(均P>0.05)。与对照组(10.09±1.10)比较,Si-NC+si-pcD-HIPK2组细胞凋亡率(2.21±0.40)降低(P<0.05),si-miR-222-3p+si-pcD-NC组细胞凋亡率(32.13±3.28)升高(P<0.05);与si-miR-222-3p+si-pcD-NC组(32.13±3.28)相比,si-miR-222-3p+si-pcD-HIPK2组细胞凋亡率(10.19±1.29)降低(P<0.05);Si-NC+si-pcD-NC组(10.03±1.16)与对照组(10.09±1.10)相比,上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-222-3p在HPV阳性宫颈癌组织中表达异常升高,抑制miR-222-3p表达可通过靶向上调HIPK2表达促进HPV感染的宫颈癌细胞凋亡。
-
单位中国医科大学附属盛京医院
