摘要
目的探讨低糖刺激下小鼠海马神经元热休克蛋白B8(heat shock protein beta-8,HSPB8)和自噬的改变,及HSPB8对自噬的调控作用。方法 HT-22(小鼠海马神经元细胞株)细胞在葡萄糖浓度为2.5和5mmol·L-1DMEM培养基中培养1h后,采用Western blot法检HSPB8,Bcl-2相关永生化基因3(BCL2-Associated Athanogene 3,BAG3)、自噬相关蛋白Beclin-1和微管相关蛋白1-轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)的表达变化;GFP-LC3融合蛋白示踪法观察HT-22细胞低糖(2.5mmol·L-1)刺激下的自噬水平;使HT-22细胞过表达HSPB8蛋白后低糖(2.5mmol·L-1)刺激1h,Western blot法检测HSPB8,BAG3,LC3-Ⅱ,Beclin-1蛋白表达变化。结果 Western blot结果表明,HT-22细胞低糖(5mmol·L-1)刺激1h,HSPB8,BAG3,Beclin-1的表达水平均升高(P均<0.05),而LC3-Ⅱ表达水平无明显变化(P>0.05);低糖(2.5mmol·L-1)刺激1h,HSPB8,BAG3,LC3-Ⅱ,Beclin-1表达水平均上调(P<0.05或<0.01);GFP-LC3融合蛋白示踪法显示低糖(2.5mmol·L-1)刺激后HT-22细胞绿色荧光斑点增多(P<0.01);过表达HSPB8后低糖(2.5mmol·L-1)刺激1h,BAG3,LC3-Ⅱ,Beclin-1表达水平上调(P<0.05或<0.01)。结论小鼠海马神经元在低糖刺激下,HSPB8,BAG3及自噬水平均升高,HSPB8可以促进自噬的发生。
-
单位宁夏医科大学总医院; 宁夏医科大学