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摘要
目的 探讨人羊膜上皮细胞(hAECs)和软骨细胞共培养,是否能把hAECs诱导分化为软骨细胞。方法采用酶消化法分离获得hAECs,采用形态学观察、免疫荧光和流式细胞仪鉴定;运用Transwell非接触共培养系统将hAECs和软骨细胞共培养21 d,诱导其分化;通过光镜观察、免疫组织化学染色和甲苯胺蓝检测诱导后hAECs形态改变、Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白多糖的表达;Western-bolt和RT-qPCR检测分化细胞COL1、COL2、AGGRECAN和SOX9的表达。结果 体外培养的hAECs和软骨细胞的形态相似,免疫组化和甲苯胺蓝染色检测诱导后hAECs中Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白多糖呈阳性表达;Western-bolt和RT-qPCR检测分化细胞中COL1、COL2、AGGRECAN和SOX9高表达。结论 hAECs在与软骨细胞共培养的诱导条件下,可以向软骨细胞分化。
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