摘要
据灰葡萄孢菌丝发育和菌核形成时期的RNA-seq数据,挑选出在这2个时期表达量差异较大的基因BC1G_03293进行基因功能的研究。结果发现,BC1G_03293在菌核发育时期表达明显上调,表达量比菌丝生长时期上调了70倍以上。该基因编码的蛋白质含有229个氨基酸,N端包含信号肽,但不含有任何已知保守结构域。通过同源重组的方法得到了BC1G_03293的敲除转化子ΔBC1G_03293-2和ΔBC1G_03293-4,并运用农杆菌转化技术得到了互补转化子ΔBC1G_03293-2-C2和ΔBC1G_03293-2-C3。BC1G_03293基因敲除后生长、致病及菌核形成等表型无明显变化,但敲除转化子的分生孢子产量显著下降,仅为野生型菌株B05.10分生孢子产量的45%,并且BC1G_03293基因互补可使敲除转化子的产孢量得到明显恢复。结果说明BC1G_03293基因与灰葡萄孢的分生孢子形成相关。
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单位华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室