摘要
目的 探索天麻素(gastrodin,GAS)及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B (PI3K/Akt)通路在脂多糖(LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤中的作用及可能机制。方法 将人肺泡上皮细胞A549分为正常对照组、LPS组、GAS组、miR-221 siRNA组、control siRNA组,采用RT-qPCR实验检测miRNA-221 mRNA的表达水平;ELISA实验检测细胞培养液中炎性因子的含量;MTT实验检测细胞活力;Western blot实验检测细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)、蛋白激酶B (Akt)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤基因-2 (Bcl-2)及半胱氨酸/天冬氨酸蛋白酶9 (Caspase9)蛋白的表达情况。结果 与LPS组比较,GAS组中GAS可明显降低LPS诱导的A549细胞中miRNA-221 m RNA的表达,升高p-Akt蛋白的表达,差异均具有统计学意义(P<0.05);与LPS组比较,miRNA-221 siRNA组抑制miRNA-221的表达后,可促进LPS诱导的A549细胞中PI3K、p-Akt蛋白的表达,差异均具有统计学意义(P<0.05);与LPS组比较,miRNA-221 siRNA组与GAS组均可明显降低LPS诱导的A549细胞培养液中肿瘤坏死因子α (TNF-α),白细胞介素6 (IL-6),白细胞介素1β (IL-1β)的含量,降低促凋亡蛋白Bax及Caspase-9的表达,促进抑凋亡蛋白Bcl-2的表达,差异均具有统计学意义(P<0.05);而miRNA-221 siRNA组与GAS组对细胞的作用比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GAS通过抑制miR-221的表达,激活PI3K/Akt信号通路,进而减少炎性因子的释放,减少细胞凋亡,提高细胞活力,发挥细胞保护作用。
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单位新乡医学院第一附属医院