小鼠主要组织相容性复合物基因各位点的提取和质粒的构建

作者：李彤; 张文谦; 侯生才; 李辉; 胡滨; 苗劲柏; 游宾; 傅毅立; 陈奇瑞; 王洋

来源：中华器官移植杂志, 2010, 31(10): 626-629.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2010.10.014

• 主要组织相容性复合物
• 移植
• 基因

目的 提取小鼠的主要组织相容性复合物(MHC)基因各个位点,构建质粒,以用于转基因实验.方法 提取小鼠RNA,逆转录cDNA,以嵌套聚合酶链反应(PCR)的方法扩增,将产物与T载体连接、克隆和测序;用内切酶切下,再与表达型载体连接,再次测序挑选克隆.结果 嵌套PCR后,产物通过测序证实为目的 基因序列,与T载体、表达型载体的连接和克隆后,经测序证实并挑选得到了正确的克隆.结论 MHC各位点基因可以通过嵌套PCR扩增获得;构建的表达型载体质粒可用于今后转入受者的实验.

• 单位
  首都医科大学附属北京朝阳医院