摘要
目的:探讨miR-145-5p通过靶向调控PHB2基因抑制非小细胞肺癌细胞(NSCLC)的增殖和迁移的作用及机制。方法:使用RT-PCR法评估miR-145-5p在NSCLC组织和癌旁组织正常人支气管上皮细胞系(BEAS-2B)和非小细胞肺癌细胞系(A549)中的表达; MTT及EDU测定miR-145-5p过表达后A549细胞的活力;划痕实验和Transwell评估miR-145-5p过表达对NSCLC迁移和侵袭的影响;荧光素酶报告基因测定法确定miR-145-5p靶向调控PHB2蛋白编码基因PHB2 mRNA的3’-非翻译区(3’-UTR)发挥作用;蛋白质免疫印迹法检测A549细胞中PHB2蛋白表达; pcDNA-PHB2转染A549细胞,并评估细胞增殖、迁移和侵袭的水平。结果:miR-145-5p在NSCLC与癌旁组织相比呈现明显低表达(P<0.01),约为癌旁组织的47.54±10.12%;利用miR-145-5p mimic转染细胞后,可在体外显著抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.001),分别约为对照组的28.31±13.97%、30.57±5.84%、32.56±6.99%; miR-145-5p通过直接结合PHB2 mRNA的3’-UTR发挥抑制作用,从而负面调节PHB2的表达; miR-145-5p和PHB2共转染A549细胞后,其增殖、迁移和侵袭能力较只过表达miR-145-5p组明显增强。结论:miR-145-5p通过靶定PHB2 mRNA来抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并且可能是抗癌治疗中有前景的治疗方向。
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单位湖北省孝感市中心医院