转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因拷贝数的检测

作者：白国辉; 刘建国; 田源; 陈筑; 白朋元; 韩琪; 顾瑜; 管晓燕; 王海慧

来源：上海口腔医学, 2013, (06): 613-617.

• 转基因番茄
• 实时荧光定量PCR
• SYBR Green
• 拷贝数
• Ct值 Transgenic tomato
• Real-time fluorescence quantitative PCR
• SYBR Green
• Threshold cycle
• Copy number

目的:采用SYBR Green实时荧光定量PCR方法检测转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因的拷贝数。方法:用本课题组前期构建的重组质粒pEAC10、pEPC10作为标准品,SYBR Green实时荧光定量PCR法对含外源目的基因pacA-ctxB、pacP-ctxB的转基因番茄植株总基因组样本重复检测,取平均值作为目的基因拷贝数。结果:含pacA-ctxB转基因番茄植株外源目的基因的拷贝数为1.3,含pacP-ctxB转基因番茄植株外源目的基因的拷贝数为3.2。结论:构建的转基因番茄植株属低拷贝转基因植物,具有较好的稳定性。

• 单位
  遵义医科大学; 贵阳市口腔医院