沙棘叶醇提物的化学成分与降糖活性研究

作者：闫昌誉; 丁肇俊; 李晓敏; 毛新亮; 余宗盛; 王志芳; 叶健文; 栗原博; 李怡芳; 梁磊^*; 何蓉蓉^*

来源：药学学报, 2023, 58(02): 396-404.

DOI：10.16438/j.0513-4870.2022-0840

• 沙棘叶
• 化学成分
• 降血糖
• α-葡萄糖苷酶
• 糖耐受
• 链脲佐菌素

本研究旨在检识沙棘叶提取物(sea buckthorn leaves extract, SBLE)的化学成分并探究其降糖生物活性。通过65%乙醇热回流制备SBLE,经UHPLC-PDA-MS/MS(ultra-high-performance liquid chromatography-photodiode array-mass spectrometry/mass spectrometry)系统分析其化学成分。本研究中的动物实验方案及程序均符合动物使用和护理的伦理原则,并已获暨南大学动物实验伦理委员会批准。昆明小鼠通过注射链脲佐菌素(streptozocin, STZ)构建高血糖动物模型, SBLE(1.5 g·kg-1)连续灌胃给药5周,检测高血糖小鼠的空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)与口服葡萄糖耐量。正常昆明小鼠SBLE(1.5 g·kg-1)连续灌胃给药10天,给予蔗糖或淀粉负荷,尾静脉取血检测120 min内的血糖变化,并收取小鼠小肠黏膜检测α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase, AG)的活性。体外直接将SBLE与酵母来源的AG共孵育检测其对糖苷酶活性的影响。Caco-2细胞经SBLE处理后,通过荧光显微镜和细胞流式术检测细胞对葡萄糖的摄取,并采用实时定量PCR技术检测SGLT1(sodium-dependent glucose transporter 1)和GLUT2(glucose transporter 2)基因的表达。质谱分析共检识了18个化合物,主要类型为鞣质和黄酮。SBLE能降低STZ高血糖小鼠的FBG并增加口服葡萄糖耐量。SBLE可有效抑制正常小鼠由淀粉摄入引起的血糖升高。SBLE对酵母来源AG具有较好的抑制活性(IC50=16.94μg·mL-1),同时能降低正常小鼠小肠黏膜AG的活性,抑制率为15.48%。SBLE(25～100μg·mL-1)可剂量依赖性地抑制Caco-2细胞对葡萄糖的摄取,并且SBLE可显著降低SGLT1基因的水平,但不影响GLUT2的表达。本研究建立了SBLE的UHPLC特征指纹图谱,质谱检识了18个化学成分;发现SBLE可通过抑制AG的活性与肠道上皮细胞对葡萄糖的吸收发挥降糖作用。

• 单位
  广东省中药药效物质基础及创新药物研究重点实验室; 暨南大学; 完美（广东）日用品有限公司