Ⅰ型辅酶脱氢酶1α亚复合物4过表达对人结直肠癌细胞上皮-间质转化的作用

作者：刘士明; 丁涛; 雷良玉; 胡琳; 冒灵; 陈超; 郭萌萌; 徐林^*

来源：医学研究生学报, 2019, 32(06): 596-601.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2019.06.008

• 型辅酶脱氢酶1α亚复合物4
• 结直肠肿瘤
• 侵袭
• 转移
• 上皮-间质转化

目的Ⅰ型辅酶脱氢酶1α亚复合物4(NDUFA4)在人结直肠癌发生中的作用和机制尚未阐明。文中旨在探讨NDUFA4过表达对人结直肠癌细胞上皮-间质转化(EMT)的作用。方法将p-NDUFA4重组质粒(p-NDUFA4组)和空载对照质粒(对照组)体外分别瞬时转入人结直肠癌HCT116细胞;利用Real-timePCR和Western blot检测各组细胞中NDUFA4的表达;划痕实验、Transwell小室迁移实验检测细胞的迁移能力变化;实时荧光定量PCR法检测MMP2、MMP9、CXCR4等表达;Western blot检测Twist、Snail、E-cadherin等表达;免疫荧光法检测细胞中E-cadherin和Vimentin蛋白的表达。结果p-NDUFA4组NDUFA4-mRNA、NDUFA4蛋白相对表达量[(1.94±0.08)%、(1.07±0.12)%]较对照组[(0.96±0.15)%、(0.6±0.05)%]明显上调(P<0.05)。p-NDUFA4组细胞的体外迁移能力、细胞迁移率[(54.36±4.08)%、(1.85±0.10)%]较对照组[(29.51±3.17)%、(0.99±0.12)%]明显升高(P<0.01)。p-NDUFA4组肿瘤细胞转移相关因子MMP2、MMP9、CXCR4、间质标志物Ncadherin、Vimentin,及转录相关因子Snail、Twist的mRNA表达较对照组显著上调,上皮标记分子E-cadherin mRNA明显下调(P<0.01)。结论过表达NDUFA4能明显促进人结直肠癌细胞EMT的发生。

• 单位
  基础医学院; 遵义医科大学