摘要
试验旨在研究干扰RBL2基因对绵羊卵泡颗粒细胞增殖、凋亡、抗氧化及类固醇类激素合成的影响。绵羊卵泡颗粒细胞转染siRBL2后,采用Cell Counting Kit-8试剂盒(CCK8)检测0、12、24、36、48 h细胞增殖情况;采用ELISA方法检测siRBL2转染48 h后细胞上清液中雌激素(E2)和孕激素(P4)的水平,采用qPCR方法检测siRBL2转染48 h后细胞增殖、凋亡、抗氧化及类固醇类激素合成相关基因表达的影响。结果表明,siRBL2转染12 h对细胞增殖无显著影响,转染24 h对细胞增殖有明显的促进作用;siRBL2转染48 h后细胞上清液中雌激素(E2)水平显著上升,孕激素(P4)水平显著下降;FOXO3a表达量显著上升,可能激活了FOXO通路;P21、P27、Caspase3、BAX、BAD基因的表达量显著下降,而CCND1、BCL-2、BCL-2/BAX的表达量显著上升;同时抗氧化基因CAT和SOD2的表达量显著上升,但类固醇类激素合成基因3β-HSD和STAR表达量显著下降,CYP11A1表达量在转染后有下降的趋势,但差异不显著,而CYP19A1表达量显著上升。综上所述,干扰RBL2可能对细胞增殖、抗氧化和雌激素的产生有促进作用,对细胞凋亡和孕激素的产生有抑制作用。
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单位动物科学学院; 山西农业大学